Produkty

Wpływ detergentów na aktywność atpazy P-glikoproteiny: różnice w zaburzeniach aktywności podstawowej i zależnej od werapamilu.

Glikoproteina P (P-gp), glikoproteina błony komórkowej związana z fenotypem oporności wielolekowej, jest odpowiedzialna za zależny od ATP wypływ różnych leków amfifilowych.Używając pęcherzyków błonowych przygotowanych z wielolekoopornej linii komórkowej DC-3F/ADX, badaliśmy zaburzenia podstawowej (tj. przy braku leku) i zależnej od werapamilu aktywności ATPazy P-gp indukowanej różnymi detergentami, przy jak również przy solubilizacji, stężeniach.Postępującą solubilizację membrany wraz ze wzrostem stężenia detergentu monitorowano za pomocą eksperymentów rozpraszania światła i wirowania.W przypadku stężeń detergentów niesolubilizujących, wszystkie testowane detergenty z wyjątkiem DOC indukowały częściowe hamowanie aktywności ATPazy P-gp, co nie było skorelowane z ilością różnych testowanych detergentów wprowadzonych do membran.Analiza indukowanej werapamilem aktywacji P-gp ujawnia, że ​​aktywność ATPazy P-gp jest różnie modulowana przez różne detergenty w stężeniach niesolubilizujących.Zatem bardziej prawdopodobne jest wystąpienie specyficznych interakcji między P-gp a detergentami niż globalne zaburzenie błony.Po solubilizacji przez różne testowane detergenty, podstawowa aktywność ATPazy P-gp została praktycznie całkowicie zahamowana, z wyjątkiem obecności CHAPS, który był w stanie zachować tę aktywność na poziomie porównywalnym do poziomu zmierzonego w błonach natywnych.Jednak indukowana werapamilem aktywacja ATPazy P-gp została utracona podczas solubilizacji P-gp przez CHAPS, ale odzyskana po rozcieńczeniu CHAPS poniżej jego krytycznego stężenia micelarnego.Obserwacje te wskazują na specyficzne interakcje między cząsteczkami P-gp i CHAPS w mieszanych micelach.Ogólnie rzecz biorąc, nasze dane świadczące o specyficznych interakcjach P-gp/detergenty są zgodne z lokalizacją miejsc transportu leków w domenach transbłonowych P-gp.