Produkty

Nadmierna przepuszczalność naczyń przyczynia się do zachorowalności w stanach zapalnych.Obecne metodologie oceny przepuszczalności in vivo oparte na wynaczynieniu albuminy związanej z błękitem Evansa (EB) są kłopotliwe i często brakuje im czułości.Opracowaliśmy nowatorską metodologię fluorescencji w podczerwieni (IRF) do pomiaru wynaczynienia albumin EB w celu ilościowego określenia przepuszczalności naczyń w modelach mysich.Przepuszczalność naczyniową wywołaną przez endotoksemię zbadano dla wszystkich narządów miąższowych, mózgu, skóry i otrzewnej za pomocą IRF i tradycyjnego pomiaru EB opartego na absorbancji w ekstraktach tkankowych.IRF narządu wzrastała liniowo wraz ze wzrostem stężenia dożylnego EB (2,5-25 mg/kg).IRF tkankowy był bardziej czuły na akumulację EB w porównaniu z metodą opartą na absorbancji.W związku z tym różnice w przepuszczalności naczyń i akumulacji EB w narządach między myszami traktowanymi lipopolisacharydem i myszami traktowanymi solą fizjologiczną były często znaczące, gdy analizowano je za pomocą wykrywania opartego na IRF, ale nie na podstawie wykrywania opartego na absorbancji.EB wykryto we wszystkich 353 narządach analizowanych za pomocą IRF, ale tylko w 67% (239/353) narządów analizowanych metodologią opartą na absorbancji, wykazując zwiększoną czułość wykrywania EB w narządach za pomocą IRF.W przeciwieństwie do tego, EB w osoczu po podaniu EB było łatwo mierzone obiema metodami z wysoką korelacją między tymi dwiema metodami (n=116, r2=0,86).Oznaczenie ilościowe specyficznych dla narządu różnic EB-IRF spowodowanych endotoksyną było optymalne, gdy porównano IRF między myszami dobranymi pod względem wagi, płci i wieku oraz z odpowiednimi poprawkami na masę narządu i stężenia EB w osoczu.Warto zauważyć, że metodologia EB-IRF pozostawia nienaruszone narządy do późniejszej histopatologii.Podsumowując, EB-IRF jest nową, wysoce czułą, szybką i wygodną metodą względnego oznaczania ilościowego EB w nienaruszonych narządach leczonych myszy w porównaniu z myszami kontrolnymi.