ONPG CAS: 369-07-3 98,0% min. Biały do białawego proszku
| Numer katalogu | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| Nazwa produktu | ONPG(2-nitrofenylo-beta-D-galaktopiranozyd) |
| Formuła molekularna | C12H15NO8 |
| Waga molekularna | 301.25 |
| Szczegóły przechowywania | 2 do 8°C |
| Zharmonizowany kod taryfowy | 29400000 |
Specyfikacja produktu
| Czystość (HPLC) | min.98,0% |
| Wygląd | Biały lub białawy proszek |
| Rozwiązanie(1% w wodzie) | Przezroczysty, bezbarwny do lekko żółtego roztwór |
| Zawartość wody(Karola Fishera) | Maks.0,5% |
| Specyficzna skręcalność optyczna [α]D20(c=1, H2O) | -65,0°C do -73,0°C |
Omówienie testu ONPG (test β-galaktozydazy)
W ostatnim czasie często pojawiają się pytania: 1. Dlaczego test ONPG może być użyty do rozróżnienia opóźnionej fermentacji laktozy?2. Dlaczego norma krajowa mówi o konieczności użycia 3% chlorku sodu trisacharydu żelaza (lub trisacharydu żelaza) do testu ONPG?3. Dlaczego w przypadku Vibrio parahaemolyticus przeprowadzając test OPNG należy kroplami dodawać toluen zgodnie z normą?Jaka jest funkcja?
Nasza firma przejrzała wiele informacji, podsumowała je i udostępniła poniżej:
Zasada: chińska nazwa ONPG to o-nitrobenzeno-β-D-galaktopiranozyd.ONPG może być hydrolizowany do galaktozy i żółtego o-nitrofenolu (ONP) przez β-galaktozydazę, więc aktywność β-galaktozydazy można wykryć na podstawie zmiany koloru pożywki hodowlanej.
Laktoza to cukier, który musi wykryć większość mikroorganizmów.Jego metabolizm wymaga dwóch enzymów, jeden to permeaza komórkowa, laktoza dostaje się do komórek pod działaniem permeazy;drugim jest β-galaktozydaza, która hydrolizuje laktozę do galaktozy.Laktoza i glukoza.β-galaktozydaza może również bezpośrednio oddziaływać na ONPG, hydrolizując go do galaktozy i żółtego o-nitrofenolu (ONP).Można to zrobić w ciągu 24 godzin, nawet w przypadku opóźnionych fermentatorów laktozowych.Wyjaśnia to zatem wyniki obserwacji pobrania kultury 1 ze skosu agarowego i zaszczepienia jej w pełnym kole w temperaturze 36°C przez 1-3h i 24h.Jeśli zostanie wyprodukowana β-galaktozydaza, żółknie w ciągu 1-3h, jeśli nie ma takiego enzymu, nie zmieni koloru w ciągu 24h.
Zgodnie z powyższymi dwoma enzymami mikroorganizmy można podzielić na następujące kategorie:
1 bakteria fermentująca laktozę (18-24 godz.) z permeazą i β-galaktozydazą P + G +;
2 Bakterie z opóźnioną fermentacją laktozy (trwające dłużej niż 24 godziny) pozbawione permeazy, ale posiadające galaktozydazę: P- G+.
3 Fermentatory nie zawierające laktozy, pozbawione zarówno permeazy, jak i galaktozydazy: P- G-.
Test ONPG może być użyty do odróżnienia bakterii opóźniającej fermentację laktozy (P-G+) od bakterii laktozy niefermentujących (PG-), takich jak:
1 Odróżnij bakterie fermentujące w późnej fazie fermentacji laktozy (P- G+) od bakterii niefermentujących laktozę (P- G-).
(a) Citrobacter (+) i Salmonella arizonae (+) z Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) z Shigella sonnei (-).
Dlaczego test ONPG wykonano przy użyciu całonocnej hodowli na 3% trisacharydzie żelazowym chlorku sodu (trisacharydzie żelaza)?Nasza firma skonsultowała się z wieloma informacjami, ale nie ma jasnego stwierdzenia.Tylko na stronie internetowej FDA jest napisane, że „Kultury przeznaczone do testowania należy zaszczepić na skosach agarowych z potrójnym cukrem i inkubować przez 18 godzin w temperaturze 37°C (lub innej odpowiedniej temperaturze, jeśli jest to wymagane). Odżywka (lub inna) skosy agarowe zawierające 1,0 Można również użyć % laktozy.oznacza: bakterie testowe zaszczepiono na pożywce z trisacharydem żelaza i hodowano w temperaturze 37°C przez 18 godzin.Dopuszczalne są również skosy z agarem odżywczym (lub inne) zawierające 1% laktozy.Dlatego wnioskuje się, że pożywka z trisacharydem żelaza zawiera laktozę.Po całonocnym wzroście bakterie wytworzyły dobrą, aktywną β-galaktozydazę.Używając takich bakterii, ONPG może być szybciej rozkładany przez β-galaktozydazę.Zjawisko eksperymentalne jest szybsze i lepiej manifestowane.Ponadto wkraplanie toluenu i łaźnia wodna przez 5 minut mają na celu całkowite uwolnienie β-galaktozydazy.
