Produkty

Uropatogenne szczepy Escherichia coli (UPEC) są główną przyczyną bakteriemii w zakażeniach dróg moczowych.Przeżycie we krwi wiąże się z różnymi mechanizmami, które pomagają oprzeć się zabijaniu za pośrednictwem dopełniacza w surowicy.Chociaż wykazano, że heterogeniczność fenotypowa bakterii wpływa na tolerancję na antybiotyki, możliwość, że powoduje ona, że ​​komórki stają się oporne na zabijanie przez układ odpornościowy, nie została przetestowana eksperymentalnie.W niniejszym badaniu staraliśmy się ustalić, czy heterogeniczność kultur bakteryjnych jest istotna dla kierowania bakterii przez układ dopełniacza w surowicy.Monitorowaliśmy podziały komórkowe w szczepie UPEC CFT073 za pomocą fluorescencyjnego białka reporterowego.Komórki fazy stacjonarnej inkubowano w aktywnej lub inaktywowanej termicznie surowicy ludzkiej w obecności lub nieobecności różnych antybiotyków (ampicyliny, norfloksacyny i amikacyny), a podział komórek i wiązanie białka dopełniacza C3 mierzono za pomocą cytometrii przepływowej i mikroskopii immunofluorescencyjnej.Heterogeniczność czasów podwojenia komórek CFT073 w surowicy umożliwiła rozróżnienie trzech fenotypowo różnych subpopulacji, z których wszystkie są rozpoznawane przez składnik C3 układu dopełniacza.Populacja szybko rosnących komórek jest odporna na lizę, w której pośredniczy dopełniacz surowicy.Dominująca subpopulacja komórek o pośrednim tempie wzrostu jest wrażliwa na surowicę.Trzecia populacja, która nie wznawia wzrostu po rozcieńczeniu z fazy stacjonarnej, jest jednocześnie chroniona przed dopełniaczem surowicy i antybiotykami.