Produkty

Opracowaliśmy nowy system dostarczania małego interferującego RNA (siRNA) przy użyciu trójskładnikowego kompleksu z polietylenoiminą (PEI) i kwasem γ-poliglutaminowym (γ-PGA), który wykazywał działanie wyciszające i brak cytotoksyczności.Binarne kompleksy siRNA z PEI miały wielkość cząstek około 73-102 nm i potencjał ζ 45-52 mV.Efekt wyciszający kompleksów siRNA/PEI zwiększał się wraz ze wzrostem PEI, a kompleksy siRNA/PEI o stosunku ładunku większym niż 16 wykazywały znaczące wyłączenie lucyferazy w mysiej linii komórkowej raka okrężnicy regularnie eksprymującej lucyferazę (komórki Colon26/Luc).Jednak w kompleksie siRNA/Lipofectamine i siRNA/PEI16 zaobserwowano silną cytotoksyczność i aglutynację krwi.Zgłoszono, że ładowanie kompleksów kationowych związkiem anionowym jest obiecującą metodą przezwyciężenia tych toksyczności.Dlatego przygotowaliśmy trójskładnikowe kompleksy siRNA z PEI (stosunek ładunku 16) przez dodanie γ-PGA w celu zmniejszenia cytotoksyczności i dostarczenia siRNA.Zgodnie z oczekiwaniami cytotoksyczność trójskładnikowych kompleksów zmniejszyła się wraz ze wzrostem zawartości γ-PGA, co zmniejszyło potencjał ζ kompleksów.Silne działanie wyciszające, porównywalne z kompleksem siRNA/Lipofectamine, stwierdzono w kompleksach trójskładnikowych, w tym γ-PGA z anionowym ładunkiem powierzchniowym.Wysoka inkorporacja trójskładnikowych kompleksów do komórek Colon26/Luc została potwierdzona za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej.Po uzyskaniu knockdown egzogennie transfekowanego genu, zdolność kompleksu do pośredniczenia w knockdown endogennego genu podstawowego, dehydrogenazy gliceraldehydo-3-fosforanowej (GAPDH), oceniono w komórkach B16-F10.Trójskładnikowy kompleks (kompleks siRNA/PEI16/γ-PGA12) wykazywał znaczący efekt knockdown GAPDH.W ten sposób opracowaliśmy użyteczny system dostarczania siRNA.