Produkty

Brucellae są czynnikami etiologicznymi brucelozy, choroby odzwierzęcej występującej na całym świecie.Bakterie te są fakultatywnymi pasożytami wewnątrzkomórkowymi, a zatem są w stanie dostosować swój metabolizm do środowiska zewnątrz- i wewnątrzkomórkowego napotykanego podczas cyklu zakaźnego.Jednak ten aspekt biologii Brucelli nie jest doskonale poznany, a składniki odżywcze dostępne w niszy wewnątrzkomórkowej są nieznane.Tutaj zbadaliśmy centralne szlaki metabolizmu C stosowane przez Brucella abortus przez usunięcie domniemanej fruktozo-1,6-bisfosfatazy (fbp i glpX), karboksykinazy fosfoenolopirogronianowej (pckA), dikinazy fosforanu pirogronianu (ppdK) i enzymu jabłkowego (mae) geny.W glukoneogenezie, ale nie w bogatych pożywkach, wzrost mutantów ΔppdK i Δmae był poważnie upośledzony, a wzrost podwójnego mutanta Δfbp-ΔglpX był zmniejszony.W makrofagach tylko mutanty ΔppdK i Δmae wykazywały zmniejszone namnażanie, a badania z mutantem ΔppdK potwierdziły, że dotarł on do niszy replikacyjnej.Podobnie, tylko mutanty ΔppdK i Δmae były atenuowane u myszy, przy czym te pierwsze były usuwane do 10 tygodnia, a drugie utrzymywały się dłużej niż 12 tygodni.Zbadaliśmy również cykl glioksylanowy.Chociaż aktywność promotora aceA (liaza izocytrynianowa) była zwiększona w bogatej pożywce, przerwanie aceA nie miało wpływu in vitro ani na namnażanie w makrofagach lub śledzionach myszy.Wyniki sugerują, że B. abortus rośnie wewnątrzkomórkowo przy użyciu ograniczonej podaży cukrów 6-C (i 5-C), które są kompensowane przez glutaminian i prawdopodobnie inne aminokwasy wchodzące w cykl Krebsa bez krytycznej roli bocznika glioksylanowego.