Produkty

CTP: cytydylotransferaza fosfocholiny α (CCTα) jest enzymem jądrowym, który katalizuje etap ograniczający szybkość w szlaku CDP-choliny w syntezie fosfatydylocholiny (PC).Lipidowa aktywacja CCTα powoduje jego translokację do otoczki jądrowej i ekspansję sieci błony wewnątrzjądrowej określanej jako retikulum nukleoplazmatyczne (NR) poprzez mechanizm obejmujący deformację błony.Laminaty jądrowe są również wymagane do stabilności i proliferacji NR, ale nie wiadomo, czy ta unikalna struktura lub ogólnie blaszka jądrowa jest wymagana do syntezy PC.Aby zbadać ten związek, blaszka jądrowa została zubożona przez RNAi lub zakłócona przez ekspresję zmutowanej laminy A (progeryny) zespołu progerii Hutchinsona-Gilforda (HGPS) i przeanalizowano wpływ na metabolizm CCTα i choliny.Wyciszanie za pośrednictwem siRNA laminatu A/C lub laminatu B1 w komórkach CHO w celu zmniejszenia NR nie miało wpływu na syntezę PC, podczas gdy podwójne knockdown niespecyficznie hamowało szlak.Potwierdzając jego niewielką rolę w syntezie PC, w NR wykryto tylko 10% przejściowo nadeksprymowanej fosfotransferazy choliny/etanoloaminy.W komórkach CHO CCTα był nukleoplazmatyczny i kolokalizowany z GFP-progeryną w fałdach jądrowych i wgłobieniach;jednak fibroblasty HGPS wykazywały nieprawidłową dystrybucję CCTα w cytoplazmie i otoczce jądrowej, czemu towarzyszyło 2-krotne zmniejszenie syntezy PC.Pomimo zmienionej lokalizacji, eksperymenty znakowania choliną wykazały, że aktywność CCT nie uległa zmianie, a hamowanie syntezy PC zostało przypisane zmniejszonej aktywności transportera choliny wrażliwego na hemicholin.Doszliśmy do wniosku, że CCTα i laminy specyficznie współpracują, tworząc NR, ale ogólna struktura otoczki jądrowej ma minimalny wpływ na aktywność CCT i syntezę PC.