Produkty

Aktywatory anhydrazy węglanowej: pierwsze badanie aktywacji ludzkiej izoformy wydzielniczej VI z aminokwasami i aminami.

Izozym wydzielniczy ludzkiej anhydrazy węglanowej (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI, sklonowano, poddano ekspresji i oczyszczono w bakteryjnym układzie ekspresyjnym.Parametry kinetyczne reakcji hydratacji CO(2) wykazały, że hCA VI ma ak(cat) 3,4 x 10(5)s(-1) i k(cat)/K(M) 4,9 x 10(7)M (-1)s(-1) (przy pH 7,5 i 20 stopniach C).hCA VI ma znaczącą aktywność katalityczną dla reakcji fizjologicznych, tego samego rzędu wielkości, co wszechobecna izoforma CA I lub przezbłonowy, związany z nowotworem izozym CA IX.Wykazano, że szereg aminokwasów i amin działa jako aktywatory CA VI ze zmienną skutecznością.l-His, l-Trp i dopamina wykazywały słabe działanie aktywujące CA VI (K(A)s w zakresie 21-42 mikroM), podczas gdy d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, serotonina , a niektóre pirydylo-alkiloaminy były lepszymi aktywatorami, z K(A) w zakresie 13-19 mikroM.Najlepszymi aktywatorami CA VI były l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-amino-l-Phe i histamina, z K(A)s w zakresie 1,23-9,31 mikroM.Wszystkie te aktywatory wzmacniają k(cat), nie mając wpływu na K(M), uczestnicząc w ten sposób w decydującym o szybkości etapie cyklu katalitycznego, reakcjach przeniesienia protonu między miejscem aktywnym enzymu a środowiskiem.