X-GAL CAS: 7240-90-6 98% Biały do białawego krystaliczny proszek
| Numer katalogu | XD90008 |
| Nazwa produktu | X-Gal (5-bromo-4-chloro-3-indolilo-beta-D-galaktopiranozyd) |
| CAS | 7240-90-6 |
| Formuła molekularna | C14H15BrClNO6 |
| Waga molekularna | 408,63 |
| Szczegóły przechowywania | -2 do -6°C |
| Zharmonizowany kod taryfowy | 29400000 |
Specyfikacja produktu
| Pojawienie się rozwiązania | Klarowny, bezbarwny do jasnożółtego roztwór (50 mg/ml w DMF:MeOH, 1:1) |
| Specyficzna rotacja optyczna | -61,5 +/- 1 |
| Wygląd | Krystaliczny proszek o barwie białej do białawej |
| Czystość HPLC | minimum 99% |
| Rozpuszczalność (5 % w DMF) | Rozpuszczalny (5% w/v, DMF) |
| Woda KF | maksymalnie 1% |
| Test (HPLC na bazie bezwodnej) | min 98% w/w |
Zastosowania X-gal
X-gal (również w skrócie BCIG dla 5-bromo-4-chloro-3-indolilo-β-D-galaktopiranozydu) jest związkiem organicznym składającym się z galaktozy połączonej z podstawionym indolem.Związek został zsyntetyzowany przez Jerome'a Horwitza i współpracowników w 1964 roku. Formalna nazwa chemiczna jest często skracana do mniej dokładnych, ale także mniej kłopotliwych zwrotów, takich jak bromochloroindoksylogalaktozyd.X z indoksylu może być źródłem X w kontrakcie X-gal.X-gal jest często używany w biologii molekularnej do testowania obecności enzymu, β-galaktozydazy, w miejscu jego zwykłego celu, β-galaktozydu.Służy również do wykrywania aktywności tego enzymu w histochemii i bakteriologii.X-gal jest jednym z wielu glikozydów i estrów indoksylowych, które w wyniku katalizowanej enzymatycznie hydrolizy dają nierozpuszczalne niebieskie związki podobne do barwnika indygo.
X-gal jest analogiem laktozy i dlatego może być hydrolizowany przez enzym β-galaktozydazę, który rozszczepia wiązanie β-glikozydowe w D-laktozie.X-gal, po rozszczepieniu przez β-galaktozydazę, daje galaktozę i 5-bromo-4-chloro-3-hydroksyindol - 1. Ten ostatni następnie spontanicznie dimeryzuje i utlenia się do 5,5'-dibromo-4,4'-dichloro -indygo - 2, intensywnie niebieski produkt, który jest nierozpuszczalny.Sam X-gal jest bezbarwny, więc obecność produktu o niebieskim zabarwieniu może być wykorzystana jako test na obecność aktywnej β-galaktozydazy.Pozwala to również na zastosowanie bakteryjnej β-galaktozydazy (tak zwanej lacZ) jako reportera w różnych zastosowaniach.
W analizie dwuhybrydowej β-galaktozydaza może być stosowana jako reporter do identyfikacji białek, które oddziałują ze sobą.W tej metodzie biblioteki genomów można przeszukiwać pod kątem interakcji białek przy użyciu drożdży lub układu bakteryjnego.Tam, gdzie zachodzi udana interakcja między badanymi białkami, spowoduje to związanie domeny aktywacyjnej z promotorem.Jeśli promotor jest połączony z genem lacZ, wytwarzanie β-galaktozydazy, co skutkuje tworzeniem kolonii o niebieskim zabarwieniu w obecności X-gal, będzie zatem wskazywało na udaną interakcję między białkami.Ta technika może być ograniczona do przeszukiwania bibliotek o rozmiarze mniejszym niż około 106. Pomyślne rozszczepienie X-gal powoduje również zauważalny nieprzyjemny zapach z powodu ulatniania się indolu.
Ponieważ sama X-gal jest bezbarwna, obecność produktu o niebieskim zabarwieniu można wykorzystać jako test na obecność aktywnej β-galaktozydazy.
Ta łatwa identyfikacja aktywnego enzymu umożliwia zastosowanie genu β-galaktozydazy (gen lacZ) jako genu reporterowego w różnych zastosowaniach.
